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糖基化分析的意义
糖基化修饰不仅影响着蛋白质的空间构象、生物活性、运输和定位,在分子识别、细胞通信、信号转导等特定生物过程中发挥着至关重要的作用。糖蛋白根据其糖链结构及糖基化位点主要有N-糖蛋白与O-糖蛋白两大类。据推断,有超过50%的蛋白质都发生了糖基化修饰,但由于糖基化的高度复杂性,绝大多数糖蛋白尚未被发现,现有数据库中只有约10%的蛋白质被注释为糖蛋白。仅仅由6个不同单糖组成的寡糖链,其结构就可能达到惊人的1012种。
糖基化定量蛋白组分析服务技术包裹,只需要将您的实验目的告诉我们并将您的样品寄给我们,我们会负责项目后续所有事宜,包括蛋白提取、蛋白酶切、糖基化肽段富集、肽段分离、质谱分析、质谱原始数据分析、生物信息学分析。
随着质谱分辨率的不断提高和生物信息学的不断发展,质谱已广泛应用于糖基化解析,通常先利用酶切或化学手段将糖链从糖蛋白释放,再分别进行糖基化位点的鉴定和糖链结构的解析。然而针对完整糖肽的解析,目前尚无成熟技术。百泰派克公司利用新一代组合型质谱Orbitrap Fusion具有的HCD/ETD“双碎裂模式”解析复杂糖蛋白的完整糖肽,然后利用Byonic软件对质谱原始数据解析,实现对N-糖基化位点和O-糖基化位点的鉴定,并对相应位点携带的糖链组成进行分析。